爱康得细胞活力测定试剂盒
1. 产品概述
细胞活力检测试剂盒(Cell Viability-Lumi Kit)是一种基于荧光素酶系统检测活细胞数量的试剂。活细胞被裂解之后释放出胞内ATP,与试剂盒中的成分发生如图1所示的催化反应,产生“辉光型”发光信号,信号强度与ATP的量在一定范围内成正比,间接反映样品中活细胞数量。
图 1. Cell Viability-Lumi Kit检测原理示意图
2. 产品特点
− 发光信号稳定,半衰期大于 5 小时;加入检测试剂后稳定5-10分钟即可读值;
− 与传统的CCK8或MTT法相比,复孔误差更为可控,无需长时间孵育,检测效率更高;
− 均相检测模式,简化实验步骤;
3. 产品规格
名称 |
货号 |
规格 |
Cell Viability-Lumi Kit |
ICA-CVL-100A |
100mL |
4. 储存条件
-80℃冰箱储存,避免反复冻融。【建议首次开启试剂盒后,根据需要进行分装】。
5. 参考实验流程
1) 材料:
− Cell Viability-Lumi Kit;【首次开启后,分装保存于-80℃冰箱中,避免反复冻融】
− 待测靶细胞;
− 白边底不透明的96孔或384孔细胞培养板;
2) 实验步骤:
(1) 细胞培养与接种
根据实验需要,将待测细胞接种于白边底不透明的96孔或384孔细胞培养板中过夜培养。每孔接种细胞数量需要根据细胞生长速度以及拟处理时间进行优化。
(2) 细胞处理
根据实验需要,对上述细胞进行各种实验设计的处理。
(3) 检测
从-80℃冰箱中取出本试剂盒,室温解冻,上下颠倒充分混匀后,根据待测的孔数,按照100uL/孔,将本产品加入到细胞板中,室温避光静置10min。
注:首次解冻后,建议按照小体积进行分装,避免反复冻融影响试剂盒检测灵敏度。
(4) 读数
将静置10min后的细胞培养板放入Luminometer中进行读数,并进行数据处理。
6. 注意事项
− 温度
本品检测的发光信号的强度和衰减率取决于酶促反应速率,而温度是影响酶反应速率因素之一。为了获得稳定可靠的结果,在进行测定之前需要将试剂、待测培养板平衡至室温。
− 多孔板
我们建议使用平底非透明检测多孔板。
− 混匀
在进行细胞活性检测时建议先将试剂进行充分摇匀混匀,悬浮细胞系(例如 Jurkat 细胞)通常比贴壁细胞(例如 L929 细胞)更易裂解。由于多孔板的孔径和液体深度均会影响混合效率,384孔板相较于96孔板更不易于混匀,使用时需注意振板参数的调整。建议在显微镜下观察细胞的裂解程度,以优化振板方案。
7. 展示数据:检测ADC(抗体偶联药物对靶细胞的杀伤)
− 靶细胞:AGS-CLDN18.2
− ADC药物:Anti-CLDN18.2-DXD
− 接种数量:5000个细胞/孔(96孔板)、
− 药物处理时间:3天
− 本公司试剂盒:100uL/孔
− 检测设备:Tecan M1000pro
− 数据处理软件:Prism GraphPad 6.0
订购下单:
点击下方链接下载试剂盒说明书:
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