酵母展示纳米抗体筛选平台

酵母表面展示(Yeast surface display)是一种真核蛋白表达系统,它是一类筛选蛋白突变体库的高通量筛选方法,在抗体表达、体外成熟和筛选等研究中应用广泛,具有高效、灵敏等特点。其基本原理是将外原靶基因与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞,用酵母细胞内蛋白转运机制将靶蛋白转移至细胞表面并固定在细胞膜上。

与传统噬菌体展示技术相比,酵母表面展示系统是将随机突变(random mutagenesis)和组合库(combinatorial 1ibrary)结合,筛选具有特定性质的肽和蛋白质的新方法,它可以避免噬菌体自身与靶蛋白的非特异性结合,是噬菌体表面展示系统的重要补充。

酵母展示技术在纳米抗体制备中的运用

在利用酵母展示系统获得纳米抗体的过程中,我们将纳米抗体展现于酵母表面,通过FACS分选阳性克隆后,再通过测序可获得多样化的抗体序列。该方法可以极好的模拟所有纳米抗体在细胞膜表面的结构,正确的反应纳米抗体与抗原的结合情况,极少出现噬菌体展示库常见非特异性结合的情况。此外,在开展多个纳米抗体筛选工作时,酵母展示库技术也更具成本上的优势。


技术流程: