CHO-K1-CD33细胞株
产品名:CHO-K1-CD33
物种:中国仓鼠卵巢细胞
保存体系:-80°C短期保存,液氮长期保存
培养条件:F12K+10%FBS
生长类型: 贴壁生长
运输方式:新鲜细胞常温运输,冻存细胞干冰运输
复苏流程:
1.带上防护面罩及防冻手套,从液氮罐中取出细胞,并迅速放入37°C水浴锅中解冻。
2.细胞解冻后,通过传递仓将细胞传递至细胞房内。
3.在生物安全柜内,取出一只15mL无菌离心管,使用1mL移液器向15mL离心管内加入4mL 培养基。
4.使用75%的医用消毒酒精棉球仔细擦拭上述在37°C水浴锅中解冻的细胞冻存管外表面,进行表面消毒。在生物安全柜内,拧开细胞冻存管,然后用1mL移液器将管内的细胞悬液吸出,逐滴加入至上述准备的含有4mL培养基的15mL离心管中,将15mL离心管盖子旋紧,缓慢上下颠倒4次,使细胞悬液混匀。
5.将含有细胞悬液的离心管置于离心机中,设置离心参数如下:200xg、室温(~25°C)离心5分钟。
6.离心结束后,将离心管轻轻转移至生物安全柜中,此时细胞离心管底部可见白色细胞团。使用电动吸引器将培养基上清吸掉(细胞团比较松散,注意不要触及底部的细胞团)。
7.使用1mL移液器加入2mL完全培养基,轻轻吹打5次重悬细胞团,计数,接种。
8.将细胞放置培养箱中过夜培养。
图示说明:流式检测CHO-K1-CD33稳转株的CD33表达情况,流式抗体为Anti-CD33-PE
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