细胞毒性淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocytes，CTL）在机体中扮演着重要的抗肿瘤角色，通过T细胞受体TCR与抗原肽MHC分子复合物的特异性识别结合形成对肿瘤细胞的监视。但肿瘤细胞的HL LA-I分子表达通常是下调的，这就成为肿瘤细胞逃脱机体免疫监视的重要机制之一，正是由于HLA- I分子的限制，机体内自然产生的TCR很难有效活化并发挥抗肿瘤作用。这使得CTL及相关的细胞免疫治疗的抗肿瘤作用受到了很大的限制。

        嵌合抗原受体（CAR）的结构类似于TCR，由胞外特异性肿瘤抗原识别区、铰链、跨膜区以及胞内信号传导域四部分组成。胞外异性肿瘤抗原识别区也称单链可变区，融合了针对肿 肿瘤抗原特异性抗体的重链和轻链可变区，能够以非HLA分子依赖的模式直接识别肿瘤相关或者特异性抗原，并通过胞内信号域传导信号、活化效应T细胞。胞内信号域来自免疫球蛋 蛋白受体的CD3ζ链及共激活信号CD28或CD137等，而跨膜区可来源于同一分子或为单次跨膜受体蛋白。通过慢病毒、逆转录病毒、mRNA等载体，让T细胞过表达CAR R分子，可以获得靶向某一特定抗原的CAR-T细胞，爱康得生物在抗体药物研发和CAR- T研发积累了丰富的经验，可以为全球客户研发具有专利的嵌合抗原受体T细胞产品，所提供的服务可满足CFDA对数据的复查，我们可以提供的服务有：
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        一、CAR结构的设计

        自公司成立以来，公司已经为全球客户提供的上百例的CAR- T服务，除常规的二代、三代CAR分子外，我们在双CAR、增强型CAR、及携带安全开关的CAR分子设计上积累了丰富的经验。此外我们可以为CAR表达载体上安装不同的M Marker，用于CAR分子表达情况的检测。

        二、肿瘤抗原的选择
        CAR- T细胞靶点的选择具有一定的规律性：

        第一，该抗原应具有较好的特异性。最理想的抗原应为肿瘤特异性抗原（Tumor specific antigen, TSA），即仅在肿瘤细胞上表达的抗原。但大多数情况下，这类抗原极难发现，因此肿瘤相关性抗原（TAA）是目前大多数CAR- T的靶点。肿瘤相关性抗原往往在正常组织中也有表达，但表达量较肿瘤组织中更少，因此在靶点的选择时应剔除那些会在重要组织中表达的抗原，以避免“On tumor off target”发生的可能。

        第二，靶蛋白应选择膜蛋白。部分TSA/TAA为分泌型抗原，此类抗原在血清中浓度较高，当CAR-T细胞回输体内后，游离的抗原与CAR- T细胞竞争性结合，从而抑制了CAR-T细胞对靶细胞的结合，因此也不合适作为CAR-T的靶点。因此只有膜蛋白是CAR- T靶点的最佳选择。

         三、scFv的获取

        scFv是CAR-T细胞特异性识别肿瘤细胞的关键，其对抗原的亲和力和特异性影响着CAR- T的有效性和安全性。通过数据库固然可以获得某些抗体的序列，但专利的缺失，限制了未来的产业化。爱康得生物在治疗性抗体筛选领域积累了丰富的经验：在抗原制备环节，我们可 可以提供多种免疫方案，除原核表达系统、酵母表达系统、哺乳动物表达系统获得的重组蛋白以外，我们也可以利用重组细胞株或腺病毒免疫宿主动物，并确保抗体可识别靶蛋白胞外段 段的天然结构；在抗体筛选环节，除传统鼠单克隆抗体筛选服务之外，我们可以进一步提供鼠抗人源化服务，可进一步获得对抗原具有高亲和力和特异性的抗体，此外我们也可以提供纳 纳米抗体和全人源抗体的筛选服务。在此基础上，我们的团队可以为您提供具有自主知识产权的scFv，用于CAR- T的构建。

        四、过表达CAR的慢病毒包装

        慢病毒是目前最为成熟的基因转染工具之一，利用过表达CAR的慢病毒为载体转染T细胞可获得CAR- T细胞。除常规的科研级CAR慢病毒以外，为满足基因治疗市场的需求，我们研发了整套无血清临床级慢病毒生产体系，建立了符合GMP要求的整套无血清生产的S.O.P及种子 子细胞库和工作细胞库，公司的慢病毒大规模制备及纯化工艺生产规模可以根据需求从200mL到50L任意设定。我们已经为全球多家临床单位提供临床级慢病毒，满足临床使用需 需求。

        五、CAR- T体内外药效学实验

        当特异的CAR- T淋巴细胞在体外与靶细胞接触时，可表现出破坏和溶解靶细胞的特性，称为淋巴细胞毒作用（cytotoxicity），即为我们希望的细胞药效。爱康得生物已经为全球近百家 家机构开展了CAR-T细胞的体内外药效学实验。我们可以为您构建所需的过表达细胞株用于细胞/动物模型的构建，通过效靶比实验验证CAR- T细胞的激活程度及对靶细胞的杀伤能力。我们在NGS小鼠成瘤领域也积累了大量的项目经验，构建过数十种小鼠成瘤模型，利用小动物成像系统，可动态检测CAR- T在小鼠体内对肿瘤的杀伤情况。