【用途】

 本制品为脂质体衍生物，通过化学方法将脂质体的侧链进行修饰，与常规脂质体相比，提高了负载高分子量质粒DNA的能力，降低了哺乳动物细胞内溶酶体对DNA/脂质体复合物的降解，从而大幅度提高质粒DNA转染哺乳动物细胞的能力。

本产品主要应用于常规的重组病毒包装过程，特别适用于重组慢病毒和重组腺病毒包装过程中293T和293A细胞的转染，可大幅度提高病毒的产量。

【组成】

  本产品共有2支，其中LVTransm转染试剂1支，共1mL，用于目的质粒的转染；pGreen对照质粒1支，1μg/μL，共20μg，用于转染过程中的阳性对照。

【使用方法】

1. 准备10cm细胞培养皿，接种2.2*10⁶个细胞/皿，加入完全培养基（DMEM高糖、10%FBS），置于37°C、5%CO2培养箱，过夜培养。

2. 从冰箱中取出转染试剂LVTransm及pGreen质粒，室温解冻（37°C解冻效果更佳）后，用移液枪上下吹打完全混匀。取出PBS缓冲液，温热至室温。取1mL PBS至24孔板的一个孔，加入10μg pGreen载体，用移液枪上下吹打充分混匀后，加入12μL LVTransm，立即用移液器上下吹打混匀，室温下静置10-15分钟。

注：保持LVTransm与目标质粒的比例为1.2μL/μg质粒DNA。

3. 将上述转染复合物逐滴加入到10cm培养皿中，轻轻晃动培养皿，充分混匀。将培养皿置于37°C、5%CO2培养箱，培养6~8小时后，将含有转染试剂的培养基去掉，更换为新鲜的完全培养基，将培养皿重新放回培养箱中继续培养。

4. 连续培养48小时后，使用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。

【注意事项】

1.使用本转染试剂转染细胞后，须在6-8小时内进行换液，否则可能会影响细胞活力。

2.室温解冻LVTransm后，溶液中可能会呈现悬浮颗粒，可60°C加热溶解后使用。